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試劑/耗材
Reagents / Consumables
丙烯?;疪GD肽(Pep- RGDfKAC);RGDfK Peptide Acryloyl ;EFL- Pep- RGDfKAC
本材料僅包含EFL- Pep- RGDfKAC。應(yīng)用于促進(jìn)細(xì)胞粘附、伸展和增殖,組織工程等。本品僅限于科研用途,請(qǐng)勿用于人體。
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RGD 肽是精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽序列,可與多種細(xì)胞整合素特異性結(jié)合,提供細(xì)胞粘附位點(diǎn)。
目前常見(jiàn)的水凝膠材料只有少數(shù)天然含有RGD序列(如基于明膠的GelMA),大多數(shù)水凝膠的細(xì)胞粘附性能較差,往往需要進(jìn)一步化學(xué)改性。常見(jiàn)策略是將RGD肽修飾在生物材料上,促進(jìn)細(xì)胞對(duì)生物材料的粘附,提高其生物性能。然而,傳統(tǒng)材料修飾過(guò)程較為復(fù)雜,且容易改變其固有性質(zhì)。為了提升水凝膠的細(xì)胞粘附性能,EFL開(kāi)發(fā)了一種易于操作的解決方案:丙烯?;疪GD肽(EFL-Pep-RGDfKAC),其可通過(guò)簡(jiǎn)單光聚合方式將RGD肽修飾到光固化水凝膠材料上。
丙烯酰化RGD肽分子含有可聚合的烯烴官能團(tuán),可與EFL 推出的光固化水凝膠如 PEGDA、AlgMA、HAMA、F127DA、DexMA 等通過(guò)光引發(fā)方式發(fā)生化學(xué)偶聯(lián),顯著提升材料的細(xì)胞粘附性能。
組分 | 性狀 | 規(guī)格 |
丙烯?;疪GD肽 | 白色粉末狀 | 40 mg/支 |
光引發(fā)劑LAP | 白色粉末狀 | 0.025 g/瓶 |
促進(jìn)細(xì)胞粘附、伸展和增殖,生物組織工程等。
干態(tài)套裝:4℃避光,6個(gè)月;-20℃避光,12個(gè)月;-80℃避光,18個(gè)月。
丙烯?;疪GD肽的使用量少、使用方法簡(jiǎn)單,只需在光固化生物材料表面光聚合即可完成修飾,操作步驟如圖1所示。
圖1. 操作步驟示意圖
(1) 多材料適用性
如圖2所示不同濃度的丙烯酰化RGD分別固定于HAMA(EFL-HAMA系列),PEGDA(EFL-PEGDA系列),F127DA(EFL-F127DA系列),DexMA(EFL-DexMA系列)和AlgMA(EFL-AlgMA系列)五種細(xì)胞粘附性能較差的水凝膠表面,結(jié)果顯示丙烯酰化RGD能明顯促進(jìn)C2C12細(xì)胞的粘附。同一種材料,細(xì)胞的粘附性隨丙烯?;疪GD使用濃度的增加而增強(qiáng)。丙烯?;疪GD肽具有多材料適用性,可與多種材料配合使用,均具有促進(jìn)細(xì)胞粘附、伸展及增殖的效果。
圖2. C2C12細(xì)胞在RGD修飾后的各類(lèi)水凝膠表面培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)效果:接種后第2天觀(guān)察
(2) 多細(xì)胞適用性
如圖3所示,將三種細(xì)胞(C2C12、MC3T3-E1、GFP-HUVEC)接種于表面修飾RGD的DexMA水凝膠上,培養(yǎng)兩天后,三種細(xì)胞均能在水凝膠表面粘附及伸展。丙烯?;疪GD肽具有多細(xì)胞適用性,可與常見(jiàn)細(xì)胞的整合素結(jié)合,從而促進(jìn)細(xì)胞的粘附、伸展及增殖。
圖3.三種細(xì)胞在RGD修飾的DexMA水凝膠表面培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)效果:接種后第2天觀(guān)察
(3) 細(xì)胞圖案化
如圖4所示,按照模型結(jié)構(gòu)利用DLP打印機(jī)(EFL-BP86系列)將RGD圖案化修飾到HAMA表面,然后將GFP-HUVEC接種于DLP打印結(jié)構(gòu)上,培養(yǎng)三天后,GFP-HUVEC能在水凝膠表面粘附、伸展并形成圖案。利用DLP技術(shù)將RGD圖案化修飾到材料表面,可引導(dǎo)細(xì)胞圖案化生長(zhǎng)。
圖4. GFP-HUVEC 在HAMA 表面圖案化生長(zhǎng)。(DLP打印直徑為10mm、厚度為2mm的圓柱;HAMA表面DLP打印一層8mg/mL丙烯?;疪GD,細(xì)胞接種后第3天觀(guān)察。)
EFL-Pep-RGDfKAC-丙烯?;疪GD肽